多肽合成

棕榈酰四肽-3(Palmitoyl Tetrapeptide-3)又称为棕榈酰四肽-7,其氨基酸序列为Pal-Gly-Gln-Pro-Arg,缩写为Pal-GQPR,属于信号类胜肽中棕榈酰寡肽系列多肽中的一种。

棕榈酰四肽-3 HPLC

合成方法

（1）树脂活化：将10g 2-CTC-Resin树脂（Lot No：GRAS1014-1，Cross-linking：1%DVB，ParticleSize：100～200mesh，Substitution 1.75mmol/g）加入反应器中，加入80mL DCM，室温搅拌浸泡10min使其充分溶胀活化。

（2）合成Fmoc-Arg(pbf)-2-CTC Resin肽树脂：在步骤（1）的树脂中加入12.49gFmoc-Arg(pbf)-OH、12mL DIEA、100mL DCM，室温搅拌反应2h， 其中2-CTC Resin、Fmoc-Arg(pbf)-OH、DIEA的摩尔比为1∶1.1∶4，用90mL异丙醇和90mL DMF各进行洗涤两次，得到保护肽树脂。

（3）将步骤（2）树脂肽中加入100mL 20%哌啶的DMF溶液，室温搅拌反应20min。抽滤去除溶液，再次加入100mL 20%哌啶的DMF溶液，室温搅拌反应10min，除掉2-CTC Resin上的9-芴甲氧羰基基团。用100mL异丙醇和100mL DMF各洗涤两次。

（4）合成Pro-Arg(pbf)-2-CTC Resin肽树脂：在步骤（3）的树脂中加入Fmoc-Pro-OH（11.8g）、HOBT（7.09g）、DIC（8.2mL）、DMF（90mL），室温搅拌反应2h，其中2-CTC-Resin、Fmoc-Pro-OH、HOBT、DIC的摩尔比为1∶2∶3∶3，用90mL异丙醇和100mL DMF各进行洗涤两次，得到保护肽树脂。

棕榈酰四肽-3  MS

（5）合成Gly-Gln(trt)-Pro-Arg(pbf)-2-CTC Resin肽树脂：重复步骤（3）和（4），依次连接FmocGln(trt)-OH、Fmoc-Gly-OH，得 到Gly-Gln(trt)-ProArg(pbf)-2-CTC Resin肽树脂。

（6）合成Pal-Gly-Gln(trt)-Pro-Arg(pbf)-2-CTC Resin肽树脂：将步骤（4）中的树脂中加入10.7mL棕榈酰氯、7.24mL DIEA、120mL DCM，室温搅拌反应20min。其中2-CTC Resin、棕榈酰氯、DIEA 的摩尔比为1∶2∶2.5，用120mL异丙醇和120mL DMF各洗涤两次，甲醇洗涤三次，干燥得24g树脂肽。

（7）制备棕榈酰四肽-3配制肽树脂切割液：将三异丙基硅烷、三氟乙酸、苯甲硫醚、水按体积比为5∶4∶88∶3加入到烧杯内搅拌混合。

（8）切割肽树脂：在步骤（6）肽树脂中加入200mL切割液，室温搅拌反应2h，过滤，滤液在38℃浓缩至油状物，倾倒到冷冻的400mL无水乙醚中，滴加1.5mL浓盐酸，大量白色固体析出，搅拌，离心、分离出上清液，室温减压烘干，得棕榈酰四肽-3粗品，经反相色谱法纯化、浓缩、冻干得到棕榈酰四肽-3纯品11.75g，纯度＞98%。