定制合成 Custom synthesis
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在固相Fmoc化学合成多肽之后,切割的方法有很多种,现在介绍两种我们常用的基本类型。
1、强酸法(TFA)
将干树脂放入摇瓶中,加入适量的含清除剂。(Scavengers)三氟乙酸切割试剂(TFA),10-25ml/g树脂,盖上盖子,在室温下间歇旋转振荡。抽滤树脂,用新TFA清洗树脂2-3次,合并滤液,滴入体积8-10倍的冰乙醚。有时,一些TFA可以通过蒸汽来获得粗肽沉淀。乙醚可以通过冰辅助降温来提高沉淀效率。最后,收集沉淀下来的粗肽产品。
适用树脂:王树脂或Rink Amide树脂
2、弱酸法(TFA或醋酸稀释)
1% TFA:
将1g 含有多肽的树脂加入含有1%TFA的二氯甲烷溶液玻璃摇瓶,密封后震荡2分钟,用氮气将滤液压入另一个含有10%吡啶的新甲醇摇瓶中,重复上述操作10次。使用30毫升 DCM, 30ml MeOH将残留在树脂上的保护多肽清洗三次。用TLC或HPLC检查和清洁残留物。合并所有滤液,减压蒸煮5%的溶剂。加入40毫升水,用冷却混合物辅助沉淀。过滤后,用清水清洗产品3次,放入真空干燥箱中,用KOH或P2O5干燥。
稀醋酸:
使用AcOH//TFE/DCM(2:2:6)用切割液处理挂在树脂上的多肽2小时,过滤树脂,用切割液洗树脂三次。在混合过滤液中加入15倍的正己烷,旋蒸去除多余的醋酸。
应用树脂:2-CTC树脂
写到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、CY系列)同位素肽等。固拓生物所有产品仅限科研使用,不得用于人体,如有违反,后果自负。
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