多肽合成

冻干肽的储存冻干肽在环境温度下运输 ，而且能长期保持数天至几个星期 。 如要长期性储存 ，则应储存 在-20 °C或更低温度 ，避开强光照 ， 曝露于水份会减少冻干肽的长时间可靠性。在应用肽以前，从冷冻中取下 ，使肽均衡至室内温度 ，随后取下器皿的外盖 ， 这将降低消化吸收边上空气中具有的水份 。

活性多肽溶解可以溶解全部冻干肽，与此同时还能在生物测定中维持其一致性和相溶性的通用性溶剂是不会有的。 挑选最好溶剂可能是“不断 实验 ”全过程的結果 。在可用的情况下，提议最先试着根据冻干相对性非常容易除去的溶剂，防止最开始使用的溶剂不溶解肽。在溶解全部肽试品以前 ，尽量 先只检测 一部分肽。 

下列 流程 给予 了溶解 肽的一般手册 。 

针对所运用的什么溶剂 ，在试着这种方式以前 ，应考虑到您的测量对溶剂的耐受力， 明确活性多肽的溶解特点评定肽的碳水化合物构成是掌握肽的溶解特点的基本专用工具 。 

肽中正离子正电荷的数目和种类决策了其在水溶性水溶液中的溶解性般 ，肽所具备的通电残基越多，就更便于溶解水溶性水溶液 。

一定要注意 ，因为肽一般在pH6-8时比在pH2-6时有大量正电荷，因而他们在达到中性pH 下更很有可能能够更好地溶解 。 除外是肽序列十分亲水性而且趋向于凝结 。

尽管序列的疏水性可以是凝的首要缘故 ，但肽也会根据普遍的氢键引线键合凝结或“疑胶化”。 依照下列手册明确肽是偏碱 ，酸性或是中性：第1步：为每一个酸性残基（D，E和C-尾端 COOH分派一个 -1值。 

第2步：为每一个偏碱残基（K，R和N尾端 NH2）分派 一个 +1值。 

第3步：在pH <6时为每一个 H残基分派 一个 +1值，在pH >6时分派数值零。 

第4步：将这种值求和测算出肽在pH7时的总电荷数（全部 D，E，K，R，C-尾端 COOH和N-尾端 NH2），进而获得肽的总净电荷。 

通电肽的溶解方式假如肽的总净电荷为负，则肽被觉得是酸性的。 假如肽是酸性的，且/或假如肽在pH7下的总电荷数超过残基数量的25％，则添加小量0.1 M硝酸钾来溶解肽，随后自来水溶解稀释到要的浓度值 。保证肽水溶液的最后pH值约为7，依据必须调整 pH值。

偏碱肽（净电荷为正）假如肽的总净电荷为正，则肽被觉得是偏碱的。 假如肽是偏碱的，且/或假如肽在pH7下的总电荷数处于残基数量的10%至25 ％，则添加小量25%的甲酸来溶解肽，随后自来水溶解稀释到要求的浓度值 。 

中性肽（净电荷为零）假如肽的总净电荷为零，则肽被觉得是中性的。 假如正电荷数量超过残基数量 的25 ％，则应用酸性肽的溶解方式 。 别的要素假如肽的总电荷数低于残基数量的10 ％，则提议应用有机溶液 ，在试着更强溶剂以前 ，超声解决肽水溶液以确定肽不溶解选定溶剂。

超声解决提高溶解功效 ，将固态肽粉碎成更小的颗粒物 。 

假如超声解决后水溶液疑胶化，发生浑浊或有由此可见颗粒物 ，则肽未彻底溶解反而是飘浮 。 这说明必须更强的溶剂 ， 假如肽不溶解 ，则冻干并去除挥发物缓冲溶液 ，试品干燥后，可以在同一 试品上检测此外的溶剂 。

亲水性 /不通电肽的溶解方式针对带有超过50％亲水性残基的肽序列 ，通电碳水化合物成分小于 25 ％的中性肽，和/或通电碳水化合物成分小于10％的肽，提议应用有机溶液 。 

提议应用乙腈 （ACN ），二甲基亚砜 （DMSO ）或二甲基甲酰胺 （DMF ）。 加上 离液序列高的化学物质 ，如盐酸胍或尿素溶液 ，可以根据破坏氢键互联网推动破坏亲水性相互影响或降低肽的“胶凝 ”。 

在挑选流程中，应考虑到您的测量对这种有机化学或离液序列高的实验试剂的耐受力 。 带有Cys（C）和Met （M）的肽序列在DMSO中不稳定。 

关键的是将肽彻底溶解在最开始应用的溶剂（比如 甲酸 ，乙腈，DMSO或DMF）中，由于肽溶解到这种溶剂中的速度一般高过水/溶剂混合物质中的溶解速度 。 假如最先自来水 /溶剂混合物质来溶解肽，最后也许会向肽试品中多余地添加很多非水溶性溶剂 。 

也很有可能必须应用超声解决来推动肽彻底溶解 ，当肽溶解于原始溶剂之后 ，尤其是溶解于有机溶液中的这些溶剂之后 ，将肽水溶液逐滴迟缓地添加到缓冲液中，一边添加 ，一边轻轻地均速拌和 ，以稀释液肽。 

这类办法可以避免肽在水溶性水溶液中的部分浓缩 ，这类部分浓缩有可能造成肽沉淀 ， 那样做的好处是，可以在视觉上观察到肽沉淀 ，并相对应地采取一定的有效措施 。

写到最后：

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